国产又好看的特效大片,奶头好大揉着好爽视频午夜院,日本不卡av一区二区三区,成全视频高清免费观看电视剧

首頁 > 技術文章 > 保留時間漂移的故障排除
保留時間漂移的故障排除
2012-05-14 [2899]

保留時間漂移的故障排除

保留時間不重現有兩種不同的情況:即保留時間漂移和保留時間波動。前者是指保留時間僅沿單方向發生變化,而后者指保留時間無固定規律的波動。將此兩種情況區分開來對找到問題的原因往往很有幫助。如,保留時間的漂移往往由柱老化引起;而柱老化不可能引起保留時間的無規律波動。事實上,保留時間漂移的多半原因是不同機理的色譜柱老化,如固定相流失(例如通過水解),色譜柱污染(由樣品或流動相所致)等。保留時間漂移的幾種zui常見的原因如下:
色譜柱平衡
如果我們觀察到保留時間漂移,首先應考慮色譜柱是否已用流動相*平衡。通常平衡需要10-20個柱體積的流動相,但如果在流動相中加入少量添加劑(如離子對試劑)則需要相當長的時間來平衡色譜柱。
流動相污染也可能是原因之一。溶于流動相中的少量污染物可能慢慢富集到色譜柱上,從而造成保留時間的漂移。應注意:水是很容易污染的流動相成分。
二 固定相穩定性
固定相的穩定性都是有限的,即使在推薦的PH范圍內使用,固定相也會慢慢水解。例如,硅膠基質在pH4時水解穩定性。水解速度與流動相類型和配體有關。雙官能團配體和三官能團配體比單官能團配體的鍵合相要穩定;長鏈鍵合相比短鏈鍵合相穩定;烷基鍵合相比氰基鍵合相穩定的多。
經常清洗色譜柱亦會加速色譜柱固定相的水解。其他硅膠基質鍵合相在水溶液環境中也可以發生水解,如氨基鍵合相等。
色譜柱污染
保留時間漂移的另一個常見原因是色譜柱污染。HPLC色譜柱是非常有效的吸附性過濾器,它可以過濾并吸附流動相攜帶的任何物質。污染源可以是:流動相本身,流動相容器,連接管、泵、進樣器和儀器密封墊,以及樣品等。通常通過實驗可判斷污染的來源。
樣品中如果存在色譜柱上保留很強的組分,就可能是使保留時間漂移的潛在根源。這些根源通常是樣品基質。如:配藥中的賦形劑,生化樣品(如血清)中的蛋白及類脂類化合物,食品樣品中的淀粉,環境水樣中的腐殖酸等。通常樣品中的強保留組分具有較高的分子量,在此情況下,保留時間漂移的同時或其后會有反壓的增加??梢酝ㄟ^使用固相提?。⊿PE)等樣品前處理方法來去除樣品基質的影響。
避免色譜柱污染zui簡單的方法是防患于未然。相比之下,找到問題的所在并設計有效的清洗步驟以去除污染物要困難的多。通常使用在給定色譜條件下的強溶劑,但并非所有污染物都可以在流動相中溶解。如THF可去除反相色譜柱中的許多污染物,但蛋白在THF中就不能溶解。DMSO常常用于去除反相色譜柱中的蛋白。
使用保護柱是個非常有效的方法。反沖色譜柱僅是不得已時采用的辦法。
四 流動相組成
流動相組成的緩慢變化也是保留時間漂移的常見原因。如流動相中易揮發組分的揮發及循環使用流動相等。
五 疏水坍塌
當小孔徑、端基封口良好的反相填料色譜柱使用接近100%的水為流動相時,有時會發生分離突然喪失及被分析物質保留明顯降低或*不保留的現象,這就是疏水坍塌。此現象是由流動相不浸潤固定相表面而致。挽救的辦法實現用含大量有機組分的流動相浸潤固定相,再用高水含量的流動相進行平衡。由是色譜柱長期儲存也會發生此現象。使用內嵌極性基團的反相色譜柱(如Waters SymmetryShield RP色譜柱)或非端基封口的色譜柱(如Waters Resolve色譜柱)也可避免發生坍塌。

查看本公司供應色譜柱請點擊

查看本公司供應島津二手液相請點擊

 

<sup id="gxdg8"><font id="gxdg8"><output id="gxdg8"></output></font></sup><big id="gxdg8"><font id="gxdg8"><delect id="gxdg8"></delect></font></big>

<sup id="gxdg8"><font id="gxdg8"><output id="gxdg8"></output></font></sup>

  1. 主站蜘蛛池模板: 卓资县| 宝贝腿开大点我添添公视频视频| 成全动漫影视大全在线观看国语 | 免费观看做爰视频| 营山县| 真人性囗交69图片| 欧美a一片| 德令哈市| 欧美熟videos肥婆| 英吉沙县| 国产农村妇女精品一二区| 内江市| 农村少妇野外A片WWW| 喜德县| 美少年高潮H跪趴扩张调教喷水| 凤翔县| 性做爰全部免费播放| 余江县| 欧美大片免费播放器| 瑞昌市| 内乡县| 梅州市| 欧美日韩国产码综合一区| 和龙市| 虞城县| 泉州市| 沂南县| 盘山县| 新昌县| 含山县| 桦南县| 准格尔旗| 武义县| 成人精品一区二区三区电影| 南川市| 利辛县| 金山区| 欧美日韩国产码高清综合一区| 欧美激情一区二区| 日本爽快片100色毛片| 好吊视频一区二区三区|